對(duì)于山東省無(wú)菌檢驗(yàn)員培訓(xùn)學(xué)員來(lái)說(shuō)，金黃色葡萄球菌檢測(cè)理論和操作是應(yīng)知應(yīng)應(yīng)會(huì)事項(xiàng)。本文先為大家說(shuō)說(shuō)金黃色葡萄球菌定性檢驗(yàn)注意事項(xiàng)，一起看正文。
山東省無(wú)菌檢驗(yàn)員培訓(xùn)知識(shí)之金黃色葡萄球菌定性檢測(cè)注意事項(xiàng)
1.7.5%氯化鈉肉湯增菌培養(yǎng)：
（1）若樣品本身在均質(zhì)后清澈，培養(yǎng)18h觀察呈現(xiàn)一定程度的渾濁（與培養(yǎng)前相比），則接種平板；若18h后仍無(wú)變化，繼續(xù)培養(yǎng)至24h后無(wú)論渾濁與否都接種至平板；
（2）若樣品本身在均質(zhì)后渾濁，則直接培養(yǎng)至24h后再接種平板。
2.血平板：36±1℃培養(yǎng)18h后觀察，若有菌落生長(zhǎng)或有菌落生長(zhǎng)的跡象（無(wú)論是否溶血），則應(yīng)酌情配制NA、BHI并分裝至小試管中（NA 10mL/管、BHI 5mL/管）、滅菌后NA應(yīng)斜放凝固成瓊脂斜面?zhèn)溆谩Ｖ裂桨迮囵B(yǎng)至24h取出，挑取菌落進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢，同時(shí)挑取菌落接種至NA斜面、BHI肉湯管，36±1℃培養(yǎng)24h。
3.接種原則：
（1）革蘭氏染色后還剩余10個(gè)或10個(gè)以上菌落，則NA、BHI分別接種5管；
（2）若多于5個(gè)（不包括5個(gè)）不足10個(gè)，則BHI接種5管，剩余的接種NA；
（3）5個(gè)及以下則全部接種BHI，不接種NA。
4.BP平板：
36±1℃培養(yǎng)24h后觀察，有菌落生長(zhǎng)則取出，無(wú)菌落生長(zhǎng)則繼續(xù)培養(yǎng)至48h后再觀察。若血平板已挑取菌落進(jìn)行證實(shí)試驗(yàn)，則不必再挑取BP平板上的菌落進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若血平板上無(wú)菌落生長(zhǎng)，則應(yīng)在24h～48h內(nèi)逐步觀察BP平板是否長(zhǎng)菌或有無(wú)長(zhǎng)菌跡象，有則需配置BHI及NA，挑取BP上的菌落進(jìn)行純化、增菌，36±1℃培養(yǎng)24h。
5.血漿凝固酶試驗(yàn)：
（1）根據(jù)BHI管數(shù)，取凍干血漿粉，每瓶用移液槍加入0.5mL生理鹽水，使其充分溶解，再換移液槍槍頭取0.3mLBHI培養(yǎng)物加入其中（每管BHI用1個(gè)槍頭），振蕩搖勻后于36±1℃培養(yǎng)，計(jì)時(shí)，每30min觀察一次，如呈現(xiàn)凝固（將試管傾斜或倒置時(shí)出現(xiàn)凝塊）或半凝固（一般的液體呈現(xiàn)凝固）則判定為陽(yáng)性。若一直不凝固，則一直觀察，直至觀察至6h（查看12次）還未凝固，則試驗(yàn)終止，判定為陰性結(jié)果；若中途出現(xiàn)完全凝固或半凝固，則試驗(yàn)終止，判定為陽(yáng)性結(jié)果。
（2）同時(shí)取金黃色葡萄球菌標(biāo)準(zhǔn)菌株（ATCC 6538以及CMCC（B）26003各一支）制成菌懸液后作為陽(yáng)性對(duì)照、以滅菌生理鹽水為陰性對(duì)照，分別接種至BHI中同步培養(yǎng)后進(jìn)行血漿凝固酶試驗(yàn)。
（3）若血漿凝固酶試驗(yàn)結(jié)果可疑，則挑取NA上的菌落接種BHI再次進(jìn)行試驗(yàn)。
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